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2009年第4期
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  • 2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.074
    摘要:末端限制性片段长度多态性技术(T-RFLP)是以荧光标记引物PCR为基础,根据末端限制性片段长度区分出微生物群体组成的一种微生物群体图谱法。本文综述了该方法在群体微生物分析上的应用及DNA提取、PCR扩增、酶切和数据分析等步骤的技巧与优化,总结了科学应用该技术的要求以及和多重PCR、gyrB基因等相结合的观点。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • PDE5抑制剂Sildenafil对小鼠卵母细胞自发成熟的影响

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.075
    摘要:采用体外培养方法和放射免疫分析法(RIA)研究磷酸二酯酶5(PDE5)抑制剂Sildenafil(西地那非)对小鼠卵母细胞体外自发成熟的作用。结果显示:该抑制剂显著抑制(P<0.05)小鼠卵母细胞的自发成熟,且其抑制作用是可逆的。放射免疫分析实验表明,Sildenafil对卵丘细胞(CCs)和裸卵母细胞(DOs)内环鸟苷一磷酸(cGMP)水平没有显著的升高作用,却能够显著提高CCs和DOs内环腺苷一磷酸(cAMP)的水平。以上结果提示,cGMP和cAMP信号通路之间的互作可能参与了PDE5调控的小鼠卵母细胞自发成熟过程。  
      
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  • 2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.076
    摘要:为实时相对荧光定量PCR检测绵羊组织中朊病毒受体LRP/LRmRNA表达水平,构建目的基因LRP/LR、内参基因β-actin的标准质粒和标准曲线;根据GeneBank中绵羊37 kD/67 kDLRP/LR(LRP/LR)和β-actin基因编码区保守序列,设计特异引物;提取肠道组织mRNA,经反转录RT-PCR扩增,产物回收纯化后,与pGEM-T-easy载体连接,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α;质粒提取后经酶切、PCR和测序鉴定后,获得阳性LRP/LR,β-actin重组质粒;将阳性重组质粒107~102梯度稀释作为模板,然后进行实时荧光定量PCR;系统软件自动生成标准曲线及回归方程。结果显示产物溶解曲线峰值单一,说明无引物二聚体及引物特异性高;LRP/LR和-βactin标准曲线相关系数分别为r2=0.999,r2=0.997,说明线性关系好;重复性试验结果显示所构建的重组质粒10次同条件扩增均Ct值具有较好的重现性,且变异率均小于5%,说明标准曲线重复性好,稳定性高。说明成功构建目的基因LRP/LR,内参基因β-actin标准质粒和标准曲线,为实时荧光定量PCR检测绵羊组织中朊病毒受体mRNA表达水...  
      
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  • 热力学因素对绵羊重组朊蛋白体外构象转化的作用

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.077
    摘要:构建了绵羊朊蛋白的原核表达载体,获得了高纯度的融合表达蛋白。并在热力学因素的作用下,研究了重组绵羊朊蛋白的构象转化。以基因型为ARQ/ARQ蒙古绵羊的血液DNA为模板,利用DNA重组技术,将绵羊朊蛋白正常成熟蛋白基因OvPrP插入表达载体pET30a,在大肠杆菌BL2l(DE3)中高效表达,获得的表达产物以包涵体形式存在,并对其进行纯化和复性。超滤浓缩后浓度约为0.5 mg/mL的OvPrP97-234,进行热力学处理,利用远紫外线圆二色谱(CD)分析热力学处理前、后蛋白的二级结构的变化,同时,对热力学处理前、后的蛋白进行了蛋白酶K抗性的检测,并对其高级结构进行了预测。结果表明:获得的表达产物经SDS-PAGE分析可见分子量为16kD的蛋白条带,Western-blotting的鉴定证实了所获得的蛋白是特异性的朊蛋白。经Jascow32软件分析,测得天然构象的OvPrP97-234的二级结构含量为:α螺旋为28.8%、β折叠为0%、转角和无规卷曲为71.1%,无蛋白酶K的抗性。经过热力学处理之后,OvPrP97-234的二级结构含量为:α螺旋为19.3%,β折叠为36.9%,转角和无规卷曲为43.8%,有一定...  
      
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  • 中国农业大学国家动物海绵状脑病实验室简介

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.078
      
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  • 梅花鹿Col Ⅹ基因的RNAi重组慢病毒载体的构建及鉴定

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.079
    摘要:研究十型胶原蛋白(Collagen type Ⅹ,Col Ⅹ),在软骨内成骨过程中所起的作用。本研究针对梅花鹿Col Ⅹ基因设计筛选2条高分RNAi靶序列,在T4 DNA连接酶的作用下分别与慢病毒载体质粒plvthm连接,形成重组质粒S2-plvthm/S3-plvthm;PCR筛选阳性克隆并测序鉴定。用Lipofectamine 2000介导S2-plvthm/S3-plvthm,pCMVdr8.91,pMD2G三质粒共转染293T细胞。结果显示:转染24 h后,观察到表达荧光蛋白的293T细胞。收集培养液后进行1000g离心5 min,所得上清液含有重组慢病毒的组分。S2-plvthm/S3-plvthm上清液中病毒滴度分别达到9.96×107TU/L和7.18×107TU/L。以此病毒感染梅花鹿角柄骨膜细胞,并进行微粒体培养,72 h后出现肉眼可见的白色微团,该细胞团有荧光表达。本试验成功地构建了针对梅花鹿ColⅩ基因的慢病毒载体,为了研究Col Ⅹ蛋白在鹿茸角骨化中的作用奠定了基础。  
      
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  • 旱稻干旱敏感突变体的筛选与鉴定

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.080
    摘要:本研究将常规旱稻品种旱稻616(HD616)经60Coγ射线200 Gy辐射诱变处理,从其变异后代获得对干旱十分敏感的突变体M616。采用田间不同程度干旱胁迫试验和根系培养试验,考察了二者的与抗旱相关的地上地下部形态、水分生理指标和产量性状。结果表明,干旱胁迫下,粒小、根细、细根多、单株产量低是M616区别于亲本HD616的基本特征,而叶片损伤度、主茎基粗、叶宽、根长、根粗、根干重是M616地上地下部对干旱反映最敏感性状。相对于亲本HD616,突变体M616根系性状发生了一系列有害变异,表现为根明显变短、变细、细根增多,因而对干旱胁迫表现十分敏感,使地上部植株明显变矮,茎秆变细弱,叶片变细窄,保水性差,因严重失水而枯萎,生物量减低,结实率下降,最终导致谷物产量严重降低,这也表明根系的生长状况与地上部的生长发育密切相关,并最终影响生物产量和谷物重量。该材料的获得为栽培稻抗旱性及其分子机理研究提供了稻种资源抗旱鉴定敏感指示品种。  
      
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  • 2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.081
    摘要:研究了种植密度对晚播小麦氮素同化积累分配及氮素利用效率的影响。以重穗型冬小麦品种兰考矮早八为材料,在晚播期(10-24—10-26)设低(150万株/hm2)、中(225万株/hm2)、高(300万株/hm2)3个种植密度进行了2年大田试验。传统播期(10-10—10-12)为对照。结果表明,晚播小麦旗叶的硝酸还原酶活性和可溶性蛋白含量显著提高,单茎氮素积累量、营养器官转移氮素对籽粒氮素积累的贡献率以及植株的氮素收获指数和氮素吸收效率均提高,而氮素利用效率和籽粒产量降低。对照播期的低、中密度处理的氮代谢酶活性、氮素积累量和氮素利用效率及籽粒产量较高,而晚播处理则以中、高密度处理较高。不同播期的中密度处理的蛋白质含量和籽粒产量高于其他2个密度处理。因此,晚播条件下兰考矮早八兼顾高产和高效利用氮素的适宜播种密度为225~300万株/hm2。  
      
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  • 2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.082
    摘要:针对目前所转育成的菜心雄性不育系配组合后不整齐的问题,采用同一轮回亲本,分别回交转育雄性不育甲型"两用系"和"临时保持系"。本文以现有的法国45 d抗热大白菜核基因雄性不育系为不育源,‘油青四九’菜心为轮回亲本,根据"复等位基因"遗传模式设计回交转育方案,采用杂交、回交、测交、自交等方法,对菜心核基因雄性不育"临时保持系"进行回交转育研究。结果表明:经过6个世代的回交转育,得到了菜心核基因雄性不育"临时保持系",其经济性状与轮回亲本极相近,组配的雄性不育系不育度和不育株率均达100%。本试验的转育方法适用于经济性状差异较大的亚种之间雄性不育系的转育,依照此转育方法可以获得与轮回亲本经济性状相似的种质资源。  
      
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  • 黄瓜组织浸提液对黄瓜幼苗及土壤生化特性的影响

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.083
    摘要:通过盆栽试验,研究黄瓜组织浸提液对黄瓜幼苗生长、根际土壤微生物数量、酶活性的化感作用。结果表明,随着黄瓜植株浸提液浓度的增加,黄瓜幼苗的株高、子叶大小、地上部干重、根干重表现为先增加后降低,而丙二醛含量先降低后增加;黄瓜根际土壤中放线菌数量显著减少25.5%,真菌、镰刀菌数量先减少后分别增加1.55%、137%,细菌数量先增加51.9%后减少12.7%;多酚氧化酶、脲酶、过氧化氢酶活性显著增加,而蔗糖酶活性显著降低。相关分析表明,多酚氧化酶活性与脲酶、过氧化氢酶活性显著正相关,与蔗糖酶活性、真菌数量显著负相关;脲酶活性与过氧化氢酶活性、镰刀菌数量显著正相关,与放线菌数量显著负相关;蔗糖酶活性与真菌数量显著正相关,过氧化氢酶活性与放线菌数量显著负相关,与镰刀菌数量显著正相关。本试验说明黄瓜组织中的化感物质影响黄瓜幼苗的生长、改变土壤的生物化学结构。  
      
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  • 2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.084
    摘要:为探讨果园铺设反光膜对桃树不同冠层叶片的光合能力和果实品质的影响,本试验利用LI-6400便携式光合测定仪,测量了铺设反光膜后不同时期桃树树体不同冠层叶片的最大光合能力,并对不同冠层内果实的品质进行了测定。结果表明:铺设反光膜能有效地改善树体内膛的光照情况,特别是树冠中下部的内膛区域,显著提高了叶片的净光合速率、气孔导度和胞间CO2含量,但对上部区域的叶片影响并不显著。铺设反光膜显著地提高了中下部内膛果实的可溶性固形物和可溶性糖含量,降低了果实的硬度和含酸量,并显著提高了果实背阴面的花青苷含量。试验表明,反光膜应用于桃树生产栽培能提高中下层叶片的光合能力,改善果实风味和外观品质,促进全红果的形成,有利于桃树的优质栽培。  
      
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  • 脱落酸影响马拉巴栗种子发育及萌发的效应研究

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.085
    摘要:探讨了脱落酸与马拉巴栗种子的发育和萌发关系。以不同发育阶段的马拉巴栗种子和离体胚为试材,观测了种子发育中内源ABA含量变化和外源ABA对种子及离体胚的萌发影响。结果表明:马拉巴栗种子发育过程中,种皮、子叶和胚轴的ABA含量先升高,后下降,最高值出现在花后50 d,最高值分别为791.45、352.68和567.85 ng/g(FW),种皮中ABA具有向内扩散的趋势,含量始终高于子叶和胚轴。随着种子的成熟,种子对外源ABA的敏感性逐渐降低,种皮ABA含量与种子活力指数呈极显著负相关,与出苗率呈显著负相关,去除种皮能使萌发率和活力指数大大增加。可见ABA是马拉巴栗种皮内含有的萌发抑制物质,且抑制作用随种子成熟而降低。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • 毛桃对北方根结线虫的抗性研究

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.086
    摘要:以实生钵苗为试材,采用人工接种、根系次氯酸钠-酸性品红染色等方法研究了毛桃对北方根结线虫的抗性。结果表明:毛桃的根结指数为24.67,接种侵入率2.6%,根中雌成虫数量占接种量的0.16%,依据有无根结和雌成虫数量占接种线虫数量的百分比标准判定其高抗北方根结线虫;毛桃实生群体对北方根结线虫的抗性具有显著的株间分离现象,免疫、高抗和中抗3种基因型个体分别占13.3%、80%和6.7%。毛桃对北方根结线虫具有极强的抗侵入与抗发育能力,是极优异的抗北方根结线虫桃树砧木树种和种质资源。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • 番茄田烟粉虱与其天敌的时空关系

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.087
    摘要:为了明确番茄田烟粉虱的主要自然天敌种类,用逐步回归分析方法、灰色系统分析法、生态位分析法和空间格局聚集强度指标分析法对番茄烟粉虱与其几种主要天敌在数量、时间、空间格局三方面的关系进行分析。综合排序的结果表明,烟粉虱的主要天敌依次是草间小黑蛛、八斑球腹蛛、粽管巢蛛。对春-夏和秋-冬两茬番茄田烟粉虱的数量进行t检验,t值为3.3768,t>t0.01(2.86),两茬烟粉虱数量差异极显著,春-夏茬烟粉虱平均为1 086头/百株,秋-冬茬平均为14940头/百株,秋-冬茬大棚阻止了棚外天敌向棚内扩散,棚内天敌种类和数量均极少,只有4种共9头/百株,是春夏茬天敌数量的0.8%。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • 低蛋白日粮条件下选育对鹌鹑生产性能的影响

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.088
    摘要:旨在研究培育低蛋白质日粮中发挥高产蛋性能的日本鹌鹑新品系。试验选用6~20周龄日本鹌鹑N、B(Normal、Brown)2个品系和杂种群(BN),共进行8个世代的选育试验,各品系采用单因子试验设计,在低蛋白CP为18%日粮条件下分选育组、非选育组以及对照组(CP24%),N、B基础群中选留15种家系,以产蛋率为主选性状,以繁殖性状为辅选性状作为选育指标进行试验。结果表明:随着世代数的增加选育组和对照组的适应力均有显著上升(P<0.05),N品系的各世代遗传改进量为0.26;另外,世代间产蛋率有增高的倾向,选育组平均累积产蛋率与非选育组较显著升高(P<0.05),特别是选育组各世代遗传改良极为显著(P<0.01)。通过选育N、B新品系,能够改善产蛋性能,在BN杂种群中效果更明显。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • 2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.089
    摘要:研究了耕作和残茬覆盖对果园土壤保蓄水能力及土壤酶活性的影响,设置以耕作(深松、翻耕、免耕)为主处理,覆盖(秸秆覆盖、无覆盖)为副处理的裂区试验,翻耕无覆盖为对照,对比分析了土壤水分贮量、土壤酶活性、苹果产量及品质等性状的影响。结果显示:玉米秸秆覆盖与间隔深松相结合,可以增加苹果园土壤的蓄水和保水能力,降水7 d后测定1 m土层贮水量比免耕不覆盖多62.47 mm,苹果收获后1 m土层内土壤贮水量比免耕无覆盖多9.2%;土壤酶活性增加,特别是表层土壤,效果更加明显(P<0.01);苹果百果重有所增加,比免耕不覆盖百果重增加了16%。在渭北旱源苹果生产基地,采用秸秆覆盖加间隔深松技术能起到较好的保蓄水作用,土壤脲酶、过氧化氢酶及蔗糖酶活性明显提高。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • 北京市大兴区典型土壤水分入渗规律田间试验研究

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.090
    摘要:对北京市大兴区3种典型土壤的水分入渗规律及其影响因素进行试验研究。用双套环法田间现场测定了大兴区11个试验点的土壤水分入渗过程,运用经验模型对各试验点的入渗曲线进行拟合。结果表明:入渗过程达到稳定的时间由快到慢依次为壤质砂土、砂质壤土和粉砂壤土;初始含水率与入渗初始阶段的速率呈线性相关关系;土壤结构和干扰等条件基本一致的前提下,稳定入渗率由大到小依次为壤质砂土、砂质壤土和粉砂壤土;土壤质地大致相同的条件下,土壤容重越大,其稳定入渗率越小。总体上,Horton入渗模型在该研究区域适用性较好。  
      
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  • 土壤试样单轴压缩试验与离散元法模拟对比研究

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.091
    摘要:土壤是典型的松散介质,利用粘连的颗粒离散元模型模拟土壤聚团的行成及破裂一直是散体力学的热点之一。本研究详细描述了利用带粘连的颗粒离散元模型制备土壤聚团的方法,利用粘连颗粒离散元模型对土样单轴压缩试验进行数值模拟分析,将模拟结果与试验结果进行对比分析。结果表明:试验与模拟得到的压缩曲线走势吻合,均呈拟线性上升,达到峰值后光滑下降;试验和模拟得到的土壤压缩时的强度极限分别为21.5和24 kPa,模拟值高于试验值11.6%。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • 双吸盘小麦精密排种器参数设计与优化

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.092
    摘要:为适应小麦精密播种的要求,对传统气吸式精密排种器进行改进,确定了各部件参数的取值范围。通过二次回归正交试验,分析吸孔直径、吸孔处压力和排种盘转速3个因素对合格率的影响,并建立了合格率的回归方程进行方差分析和拟合度检验。结果表明:影响小麦气吸式排种器合格率的因素依次为:排种盘型孔直径、吸孔处风压和排种盘转速;经回归方程优化得到各因素的最优组合为,吸孔直径2.6 mm、排种盘转速28.3 r/min、吸孔处压力2.28 kPa,此时排种器合格率达到97%,满足小麦精密播种的要求。改进后的小麦精密排种器结构简单,较传统气吸式精密排种器排种性能有较大提高。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • 温室自动变量施药系统设计

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.093
    摘要:针对温室内手动施药喷雾质量差、容易造成施药人员中毒的问题,基于AT89S52单片机开发环境设计温室自动变量施药系统;研究了喷杆行走速度和喷头流量对作物单位面积雾滴沉积量的影响。实验结果表明:所设计的温室自动变量施药系统可根据上位机对CCD采集的病害信息处理结果,对喷杆行走速度和喷头流量进行控制,实现无人自动变量施药;在喷头型号、喷雾压力一定的条件下,改变喷杆行走速度和喷头流量可使单位面积雾滴沉积量的变化范围为0.27~0.76μg/cm2,很好地实现了自动变量喷雾;单位面积雾滴沉积量与喷杆行走速度和喷头流量均呈线性关系,相关系数R2均大于0.99。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • 农村低压电网规划设计应用软件开发

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.094
    摘要:对已有低压电网规划模型进行研究改进,建立了考虑无功补偿的电网规划数学模型,并对常用一次电气设备进行归类分析,完成了设备数据库的设计。使用VC++6.0开发了农村低压电网规划设计应用软件,该软件主要由规划计算模块和设备选型功能模块组成,软件系统结构完整、功能模块独立、数据维护方便。通过软件计算不仅解决了低压台区的配变及线路容量、截面及选址问题,而且借助计算机辅助规划设计实现了电气设备选型的自动化,减轻了规划专责人员的工作量,具有一定实用价值。实际应用结果表明:采用该软件得出的优化规划方案和设备选型结果较原始经验方案在经济和技术上更优,其中设备选型综合考虑了选型的具体要求,选型结果包含配置设备的名称、规格和数量等,基本实现了设备选型的自动化。  
      
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  • 矩形加筋圆柱壳轴压屈曲承载力优化

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.095
    摘要:针对薄壁圆柱壳结构在轴压作用下容易发生屈曲失稳的问题,采用有限元分析软件ANSYS提供的APDL进行二次开发,建立加筋圆柱壳结构的优化模型,采用序列线性规划法对蒙皮厚度和加筋尺寸进行优化。将优化后的力学性能与等体积无加筋圆柱壳承载力的数值解及解析解进行比较,得到加筋圆柱壳的合理布筋,以及7种纵向和环向加筋数量算例的优化结果。结果表明:在加筋比较稀疏或比较密集的情况下,优化后圆柱壳的承载力相对于等体积无加筋圆柱壳基本没有提高;而加筋数量比较适当时,优化后圆柱壳的屈曲承载力比等体积无加筋圆柱壳的屈曲承载力最大提高了约50%。加筋布置方案及优化的尺寸结论对加筋柱壳设计具有参考价值。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • 2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.096
    摘要:通过实际调研和文献分析,在对我国秸秆禁烧的政府监管分为严厉惩罚和奖惩激励2种模式的基础上,采用静态纳什均衡博弈方法分析政府监管不同模式下,农户与政府2个主要利益主体的策略选择及其效果。结果表明:采取激励型政策措施引导农户综合利用秸秆资源,是当前政府在监管秸秆焚烧措施中比较有效的方式,但这一激励政策发挥作用的基本约束条件是,政府的激励措施应能弥补农户处置秸秆所带来的成本损失。  
      
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    更新时间:2023-12-22
  • 我国农村金融市场资金供求分析

    2009(4) DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2009.04.097
    摘要:为深入了解我国农村金融市场资金供求现状,深化农村金融体系改革,通过抽样法对农户、农村企业、农村金融机构的资金需求和供给进行问卷调查,使用统计分析方法对调查结果进行描述性分析。结果表明:农村资金通过农村正规金融机构流出农村,农户和农村企业存在着规模巨大的资金需求,而农村信用社等正规金融机构的资金供给只能满足这些资金需求的一小部分,巨大的资金缺口需要民间资金供给满足。在农村金融市场上应该放松对金融机构和金融业务的管制,培育多种所有制形式的农村金融机构,提高金融效率,以弥补农村金融市场上资金供给的缺口。  
      
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    更新时间:2023-12-22